ОЦЕНКА СОДЕРЖАНИЯ ГЛЮКУРОНИДНОЙ И СВОБОДНОЙ ФОРМЫ Δ9-ТЕТРАГИДРОКАННАБИНОЛА В МОЧЕ МЕТОДОМ СВЕРХПРОИЗВОДИТЕЛЬНОЙ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ С ТАНДЕМНОЙ МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЕЙ
Аннотация
Тетрагидроканнабинол (Δ9-ТГК) является липофильным соединением, в организме человека практически полностью метаболизирует до 11-нор-дельта-9-тетрагидроканнабинол-9-карбоновой кислоты (Δ9-ТГК-СООН). Для эффективного выведения почками Δ9-ТГК-СООН конъюгируется с глюкуроновой кислотой, превращаясь в более полярное и растворимое в воде соединение. Δ9-ТГК-СООН и Δ9-ТГК-СООН-глюкуронид являются основными маркерами употребления марихуаны. Для извлечения целевых соединений использовали жидкость-жидкостную экстракцию, разрушение химических связей конъюгатов осуществляли посредством ферментативного гидролиза (β-глюкуронидаза E.-Coli К12). Анализ метаболитов Δ9-ТГК в моче проводили методом сверхпроизводительной высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией с электрораспылительной ионизацией в режиме регистрации отдельных реакций. В работе представлены результаты масс-спектрометрических параметров регистрации депротонированной молекулы Δ9-ТГК-СООН с m/z 343, в результате которой определены величина энергии соударений для получения ионов-продуктов с максимальной интенсивностью и точное значение амплитуды радиочастоты S-образной линзы.Показано, что регистрация отрицательных ионов при определении Δ9-ТГК-СООН является предпочтительной. Выбраны переходы, которые позволяют повысить чувствительность и селективность определения Δ9-ТГК-СООН, а также исключить влияние компонентов матрицы. Определено, что переход m/z 343 → 245 (30 эВ) обладает наибольшей интенсивностью и минимальной интерференцией коэлирующих компонентов матрицы. Рассчитаны концентрации и процентное содержание глюкуронидной и свободной фракций Δ9-ТГК-СООН в образцах мочи лиц, употреблявших марихуану. Концентрации глюкуронидной и свободной формы Δ9-ТГК-СООН в организме человека изменяются не пропорционально. Показано, что при суммарной концентрации Δ9-ТГК-СООН в организме человека более 100 нг/мл концентрация свободной формы резко возрастает.
Для цитирования:
Чуловская А.Л., Дикунец М.А. Оценка содержания глюкуронидной и свободной формы Δ9-тетрагидроканнабинола в моче методом сверхпроизводительной высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией. Изв. вузов. Химия и хим. технология. 2017. Т. 60. Вып. 4. С. 95-99.
Литература
The Prohibited List International Standard, January 2017 [Электронный ресурс] URL: https://www.wada-ama.org/en/resources/science-medicine/prohibited-list (дата обращения-28.01.2017) The Prohibited List International Standard, Janu-ary 2017 [Electronic resource] URL: https://www.wada-ama.org/en/resources/science-medicine/td2017-dl (date of access-28.01.2017).
Brenneisen R., Meyer P., Chtioui H., Saugy M., Kamber M. Plasma and urine profiles of Δ9-tetrahydrocannabinol and its metabo-lites 11-hydroxy-Δ9-tetrahydrocannabinol and 11-nor-9-carboxy-Δ9-tetrahydrocannabinol after cannabis smoking by male volunteers to estimate recent consumption by athletes. Anal. Bioanal. Chem. 2010. V. 396. N 7. P. 2493-2502. DOI: 10.1007/s00216-009-3431-3.
Takeda S., Jiang R., Aramaki H., Imoto M., Toda A., Eyanagi R., Amamoto T., Yamamoto I., Watanabe K. Δ9-tetrahydrocannabinol and its major metabolite Δ9-tetrahydrocannabinol-11-oic acid as 15-lipoxygenase inhibitors. J. Pharm. Sci. 2011. V. 100. N 3. P. 1206-1211. DOI: 10.1002/jps.22354.
Cela-Pеrez M.C., Bates F.L., Jimenez-Morigosa C., Lendoiro E., de Castro A., Lopez-Rivadulla M., Cruz A, Lopez-Vilarino J.M., Gonzalez-Rodríguez M.V. Water-compatible imprinted pills for sensitive determination of cannabinoids in urine and oral fluid. J. Chromatogr. A. 2016. V. 1429. P. 53-64. DOI: 10.1016/j.chroma.2015.12.011.
Kim S.Y., Kim J.Y., Kwon W., In M.K. Kim Y.E., Paeng K.J. Method development for simultaneous determination of ampheta-mine type stimulants and cannabinoids in urine using GC–MS. Microchem. J. 2013. V. 110. P. 326-333. DOI: 10.1016/j.microc.2013.04.004.
Lee K.M., Kim H.J., Son J., Park J.H., Kwon O.S., Lee J. Simple quantitation of formoterol and 11-nor-Δ9-tetrahydrocannabinol-9-carboxylic acid in human urine by liquid chromatography-tandem mass spectrometry in doping control. J. Chromatogr. B. 2014. V. 967. P. 8-12. DOI: 10.1016/j.jchromb.2014.07.009.
Thevis M., Thomas A., Schanzer W. Current role of LC-MS(/MS) in doping control. Anal. Bioanal. Chem. 2011.
V. 401. N 2. P. 405-420. DOI: 10.1007/s00216-011-4859-9.
Rumpler M.J. Quantitative analysis of 11-nor-9-carboxy-tetrahydrocannbinol (THC–COOH) in urine by LC–MS/MS following a simple filtration. J. Chromatogr. B. 2014. V. 957. P. 77-83. DOI: 10.1016/j.jchromb.2014.02.056.
